本发明提供了一种能准确、快速、灵敏、结果易于判读的松材线虫检测试剂盒和检测方法。本专利发明的检测靶标为不同物种中高度保守的拓扑异构酶酶基因的内含子区域，样本的检测准确率为 100%；灵敏度达 0.01ng DNA；能检测所有发育阶段松材线虫，克服了形态学鉴定中对线虫发育阶段的限制；同时也克服了利用松材线虫 rDNA 作为检测靶标可能造成由于 rDNA 在近缘种间的极度保守性而出现的检测特异性不足的问题；克服了由凝胶电泳 PCR 检测技术带来的操作复杂、技术性强、耗时长、环境污染等方面的不足。目前开发的松材线虫自动化分子检测系统进一步实现了松材线虫荧光 PCR 检测的硬件和软件的有机结合，该技术已在全国 17 省建立了省、市、县松材线虫监测、检疫全国网络体系，检测样本 8000 余份，准确性达到 100%。该技术也将在我国出入境检验检疫部门开展松材线虫的口岸输出、输入等领域有着广泛的推广应用前景。

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2016 年第十八届中国专利优秀奖